Бесклеточные системы
Изучение процесса репликации вирусов в клетке —
одна из наиболее интересных и активно развивающихся областей
современной вирусологии. Успехи, достигнутые молекулярной биологией
за последние полтора десятка лет, сильно расширили наши
представления об этом процессе. Вирусы в свою очередь оказались
весьма ценным экспериментальным объектом для молекулярных биологов.
В настоящее время нам гораздо больше известно о репликации вирусов
животных и бактерий, чем о репликации вирусов растений. В
значительной степени это обусловлено ограничениями тех
экспериментальных систем, с которыми приходится иметь дело
специалистам по вирусам растений. Мы пока не располагаем методом,
который позволил бы нам нарожать вирусом одновременно все или почти
все клетки растения и наблюдать события, происходящие в них более
или менее синхронно, как это возможно в случае вирусов бактерий и
большинства вирусов животных. Разработка подобной системы — одно из
главных условий успешного развития. Именно отсутствие такой системы,
а также то обстоятельство, что для заражения необходимо огромное
количество вирусных частиц, следует считать главными, техническими
причинами, затрудняющими исследования в области молекулярной
биологии вирусов растений и обусловливающими отставание этих
исследований от работ, проводимых на вирусах бактерий и животных.
Обычно для исследований используются листовые
пластинки. У большинства растений, применяемых в такого рода опытах,
от 50 до 70% всей свежей массы приходится на долю листьев, причем
конечная концентрация вируса в листе часто оказывается в 10—20 раз
выше, чем в других частях растения. Различают четыре типа систем,
используемых для исследования: 1) интактные растения, 2)
переживающие ткани, 3) клетки или органы в культуре и 4)
бесклеточные системы. Преимущества и трудности работы с каждой из
этих систем обсуждаются ниже. Некоторые вирусы, растений
реплицируются в организме насекомых, которые являются их
переносчиками.
Нужно, однако, иметь в виду, что, хотя эти
трудности и существуют, некоторые аспекты процесса репликации
вирусов могут быть изучены только на интактных, развивающихся
растениях. Лишь на них можно, например, проследить зависимость между
репликацией вируса и появлением симптомов мозаики.
Работа с листьями имеет ряд преимуществ.
Во-первых, в этом случае события можно точно проследить во времени
(считая с момента инокуляции). Во-вторых, из разных растений можно
отобрать листья примерно одинакового размера, а в качестве контроля
использовать половинки листьев. |