Метод центрифугирования

Бракке разработал метод центрифугирования в градиенте плотности сахарозы для очистки вирусов. Этот метод наряду с расширением наших представлений о действии химических факторов, влияющих на стабильность вирусов в экстрактах, позволил осуществить выделение и частичное изучение большего числа нестабильных вирусов. В настоящее время почти для 40 вирусов известны размер и форма частиц, а также количество и тин содержащейся в них нуклеиновой кислоты. В очищенных препаратах ряда вирусов были обнаружены вирусные частицы с неполным содержанием нуклеиновой кислоты. С тех пор неполные частицы такого рода ужо выявлены в препаратах большинства мелких икосаэдрических вирусов. Исследование инфекционности этих частиц, выделяемых обычно методом фракционирования в градиенте плотности, сначала навело на мысль, что только полностью сформированные частицы инфекционные. Более тщательное фракционирование показало, что для проявления инфекционности некоторых из этих вирусов необходимо взаимодействие частиц двух типов. Нечто подобное было обнаружено и при исследовании препаратов палочкообразных частиц вируса погремковости табака, которые содержат длинные и короткие палочки. Длинные частицы могут осуществлять синтез вирусной РНК, но не способны производить капсидиый белок. Короткие палочки сами по себе инертны, но содержат РНК, используемую в качестве матрицы для синтеза капсидного белка, имеющегося как в длинных, так и в коротких частицах. Более сложная система, состоящая из 4 или даже 5 компонентов, обнаружена в препаратах вируса мозаики люцерны. Биологическое значение этих многокомпонентных вирусов пока неясно, однако возможно, что у таких вирусов, содержащих одноцепочечную РНК, достигается большая генетическая гибкость. Их обнаружение, по-видимому, делает возможным проведение генетических экспериментов на вирусах растений. Уже удалось получить искусственно смешанные вирусы путем одновременного введения в клетку крупной частицы одного штамма и малой частицы другого штамма.