Полная потеря инфекционности

В настоящей главе различного типа агенты, инактивирующие вирусы, разделены на несколько категорий. В некоторых случаях это подразделение довольно искусственно, так как оно не отражает тесного взаимодействия различных агентов в процессе инактивации вируса. Например, влияние температуры при изучении действия различных факторов на вирусы in vitro зависит от значения рН раствора, а включение 5-фторурацила в РНК вируса in vivo повышает ее чувствительность к инактивации под действием ультрафиолета.

Начиная с самых ранних этапов исследования вирусов растений в качестве признака, служащего для идентификации вирусов, использовали так называемую «термальную точку гибели», причем опыт проводили в свежеотжатом соке листьев. Для различных вирусов самые высокие температуры, при которых после нагревания в течение 10 мин еще можно обнаружить некоторую инфекционность, лежат в пределах 40-—95 °С, а для многих из них — в пределах 50—60 °С. Концентрация вируса в исходном материале, рН и состав сока, характер материала, используемого для разбавления, состояние испытуемых растений — все это может влиять на результаты подобного рода исследований. Для более детального изучения процесса тепловой инактивации вирусов используют очищенные вирусные препараты.

Для некоторых вирусов, таких, например, как ВТМ и Х-вирус картофеля, тепловая инактивация, по-видимому, тесно связана с денатурацией вирусного белка. Температурный коэффициент инактивации велик, что вообще характерно для денатурации белка. У подобного рода вирусов невозможно вызвать полную потерю инфекционности, если при этом не наблюдается также выраженная в значительной степени денатурация белка. Лауфер и Прайс пришли к выводу, что тепловая денатурация белка ВТМ в 0,1 М фосфатном буфере при рН 7 представляет собой реакцию, подчиняющуюся кинетике первого порядка и характеризующуюся энергией активации примерно 153 000 кал/моль. О том, что денатурация действительно подчиняется кинетике первого порядка, свидетельствует тот факт, что количество вируса, инактивированного к моменту времени t, прямо пропорционально концентрации активного вируса, присутствующего в препарате в данный момент.