Вирус огуречной мозаики
Вирус мозаики люцерны и вирус огуречной мозаики, а
также изолированная из них РНК быстрее, чем ВТМ или РНК ВТМ, что
говорит о некоторой специфичности при взаимодействии вируса с
красителем. Вирус огуречной мозаики и его РНК отличались от двух
других изученных вирусов тем, что в этом случае заметная инактивация
на свету происходила даже в отсутствие красителя. Что лежит в основе
этого различия, неизвестно; возможно, оно связано с присутствием в
вирусном препарате больших количеств металла, особенно железа.
Спектр действия инактивации РНК ВТМ акридиновым
оранжевым имеет сходство со спектром поглощения комплекса краситель
— РНК ВТМ. В модельных экспериментах было показано, что акридиновый
оранжевый и синий вызывают избирательное разрушение на свету с
образованием рибозы, мочевины, и других продуктов. По-видимому,
наиболее вероятным механизмом инактивации ВТМ в мягких условиях
является отщепление или изменение остатков гуанина без разрыва цепи
РНК. Зингер и Френкель-Конрат показали, что два других красителя
являются очень активными катализаторами, причем примерно в 1000 раз
более эффективен. Инактивация под действием этих двух красителей
была связана с изменением остатков гуанина. Цепь РНК при этом не
разрушалась, но небольшое количество измененного гуанина
освобождалось из инактивированной РНК. Если вирус размножался в
листовых дисках в присутствии красителя, то образование вируса было
слегка угнетено и удельная образованного вируса несколько"
уменьшалась.
Зингер и Фрепкель-Конрат показали, что скорость
инактивации РНК ВТМ под влиянием железа значительно увеличивалась
при воздействии видимого света. При этом потеря инфекционности,
наблюдавшаяся при О °С и нейтральном значении рН, сопровождалась
разрывом цепи РНК, о чем свидетельствовало уменьшение молекулярной
массы. Эксперименты, выполненные на модельных соединениях типа
нуклеотидов, показали, что при комбинированном действии железа и
света основания разрушались и разрывалась связь.
Зингер и Фрепкель-Конрат пришли к выводу, что в
ходе инактивации, интактной РНК изменения в основаниях
предшествовали разрыву связи. Поскольку даже трех эквивалентов
железа на 1 моль РНК ВТМ достаточно для того, чтобы вызвать заметный
эффект, вполне вероятно, что следы железа, прочно связанные с РНК в
вирусах, служат фактором, ответственным за нестабильность
изолированных РНК. Инактивацию нестабильных вирусов in vivo обычно
считают результатом тепловой инактивации или действия ферментов.
Однако вполне возможно, что присутствие железа и видимый свет также
оказывают влияние на процессы инактивации in vivo. |