Увеличение числа мутантов
Методы могут быть использованы для количественной
оценки мутагенного действия на вирус того или иного агента. Можно,
однако, возразить, сославшись на то, что различные штаммы, уже
присутствующие в вирусных препаратах, обладают различной
чувствительностью к действию исследуемого мутагенного агента;
та или иная обработка может родительский штамм в большей степени,
чем спонтанные мутанты, уже присутствующие в препарате. По крайней
мере по отношению к мутантам, полученным с помощью азотистой
кислоты, такое возражение высказывалось.
Третий метод выделения мутантов основан на
использовании в таком разведении, при котором заражается лишь
половина (или менее) растений. В опыт берут растения, реагирующие
системным заболеванием. Можно допустить, что при этих условиях
большинство заболевших растений инфицированы одной вирусной
частицей. В отношении количества растений указанный метод
расточителен, однако с его помощью удается изолировать дефектные
мутанты, которые не могут быть выделены в инфекционной форме с
помощью методов экстракции, используемых для выделения обычных
штаммов.
В ряде работ изучалось действие па вирусы растений
физических и химических агентов, обладающих мутагенным действием на
другие биологические объекты. Почти все работы такого рода
проводились на ВТМ. Некоторые агенты (например, азотистая кислота)
оказались явно мутагенными для ВТМ; что касается многих других
агентов, то данные о них не столь убедительны.
Кауше и Штуббе первыми предприняли попытку
индуцировать мутации ВТМ с помощью облучения листьев растений табака
рентгеновскими лучами до или после заражения. При этом было выделено
несколько мутантов, однако из-за низкой частоты их появления нельзя
было с уверенностью считать, что речь идет об индукции мутантов
облучением. Подобные возражения вызвали и результаты опытов Гоуэна,
который облучал ВТМ in vitro. Действие рентгеновских и
ультрафиолетовых лучей па ВТМ позднее изучал Мундри. Видимое
увеличение числа мутантов после облучения очищенных вирусных
препаратов наблюдалось лишь в том случае, если в экспериментах
использовали препарат, обладающий некоторым уровнем спонтанных
мутаций, причем концентрация инфекционного вируса в контрольном
препарате была более высокой, чем в облученном. Видимая частота
мутаций увеличивалась в том случае, если количество активного вируса
снижалось либо в результате действия облучения, либо в результате
разведения инокулума буферным раствором. На основании этих данных
Мундри пришел к выводу, что данные о мутагенном действии
рентгеновских и ультрафиолетовых лучей на ВТМ неубедительны. |