Причина эффективности

Известны растения, в которых преимущественно репродуцируются определенные штаммы вируса. Такое растение-хозяин может быть использовано для отбора некоторых штаммов. Различные вирусные штаммы могут отличаться но степени репродукции и скорости распространения в данном растении при различных температурах. Так, в целях получения штамма ВТМ, обладающего способностью к наиболее эффективной репродукции при 36 °С, Леберье и Хирт применили метод серийных пассажей вируса на растениях табака в условиях постепенного повышения температуры.

Большинство работ по получению искусственных мутантов вирусов растений проводилось с ВТМ. С целью выделения мутантов были использованы растения-хозяева, реагирующие на инокуляцию всеми штаммами появлением местных некрозов, как, например, N. glutinosa и N. tabacum, сорт Ксанти. Были использованы также другие виды растений рода Nico-tiana, у которых обычно возникают системные мозаичные заболевания, а при заражении некоторыми штаммами — местные некрозы. Один из обычных методов выделения мутантов состоит в том, чтобы инокулировать растения, реагирующие местными некрозами, при таких условиях, при которых большинство некрозов возникает в результате заражения одной вирусной частицей. Иногда мутанты вызывают местные некрозы, легко отличимые от вызываемых обычным штаммом. Часто поражения, вызываемые новым штаммом, бывают меньше по размеру. Для выявления других различий в характере симптомов болезни, вызываемых известным и мутантным штаммами, экстрактами ткани, полученной из местных поражений, вызываемых мутантным штаммом, инокулировали растения, реагирующие системным заболеванием. При этом мутантные штаммы можно идентифицировать по характеру симптомов развивающегося заболевания.

Другой метод выделения мутантов и определения частоты мутаций состоит в инокуляции родительским штаммом вируса растений, которые реагируют системным заболеванием без некрозов или каких-либо других явных местных поражений. В этом случае можно выявить мутанты, вызывающие некрозы, желтые пятна или другие характерные местные поражения в инокулированном растении. Этот прием позволяет отбирать мутанты, принадлежащие к определенному классу, причем в ряде случаев бывает трудно даже с помощью повторных пассажей материала, выделенного из отдельного местного поражения, получить изолят, свободный от примеси родительского штамма.